Tartalom
A polimeráz láncreakció (PCR) elemzése laboratóriumi technika. A PCR-teszt célja, hogy kis mennyiségű DNS-t találjon egy mintában, a erősítés. A PCR-amplifikáció során az érdeklődésre számot tartó DNS-t addig ismételjük, amíg elegendő mennyiség nem lesz rá az elemzéshez és kimutatáshoz. Például PCR-rel fel lehet használni a vizeletmintában jelen lévő gonorrhoea vagy chlamydia kialakulását okozó organizmusok kis mennyiségű DNS-ének azonosítását.Hogyan működik a PCR?
A PCR első lépése a létrehozás alapozók. Ezek a DNS rövid szekvenciái, amelyek megegyeznek a detektálni kívánt DNS minta végeivel. Ők a trükk egy adott DNS-darab megtalálásához, felerősítéséhez és kimutatásához. Ezt a DNS-darabot fel lehet használni egy kórokozó azonosítására. Használható olyan dolgokra is, mint az antibiotikum-rezisztencia génjeinek felderítése.
Miután megkapta az alapjait, a PCR következő lépése a minta melegítése, hogy a kettős szálú DNS két szálra váljon szét - ezt nevezzük denaturáció. Aztán az alapozókkombináljuk a minta DNS-sel. Ezek után egy DNS polimeráz a DNS-replikáció megkezdésére szolgál a primer helyén. Végül a DNS-t melegítjük, hogy még egyszer elválasszuk a szálakat. Ezzel az egész PCR folyamat újrakezdődik.
A mintában jelen lévő érdekes DNS-szegmens mennyisége minden PCR-ciklussal exponenciálisan növekszik. Az első ciklusban egy példányból kettő lesz. Ezután két példányból négy lesz, majd nyolc lesz, stb. Ez az exponenciális növekedés azt jelenti, hogy általában csak 20-40 ciklusra van szükség annak megállapításához, hogy a kérdéses DNS jelen van-e. (Ha van DNS, akkor 20-40 ciklus is elegendő ahhoz, hogy elegendő mintát nyújtson az elemzéshez).
A DNS denaturálásának, a primerek felvitelének és a DNS megnyújtásának egy polimeráz láncreakciójának minden lépése különböző hőmérsékleteken történik. Ez azt jelenti, hogy a kezdeti keverék összeállítása után a lépéseket egy úgynevezett eljárással lehet szabályozni termociklus. A termociklizálás azt jelenti, hogy a hőmérsékletet a szükséges szinteken tartják elég hosszú ideig ahhoz, hogy minden lépés megtörténjen. Így a PCR hatékony módszer a cél DNS mennyiségének amplifikálására. Valójában egyetlen kémcsőben valósítható meg, emberi beavatkozás nélkül.
A polimeráz láncreakció forradalmat jelentett a biológiai technikában, amikor először kifejlesztették az 1980-as évek elején. A PCR alkotója, Kary Mullis 1993-ban végzett munkájával elnyerte a kémia Nobel-díját.
Miért releváns a PCR az STD tesztelés szempontjából?
Polimeráz láncreakció és a kapcsolódó technikák, mint pl ligáz láncreakció, egyre nagyobb jelentőségűnek bizonyulnak az STD tesztelésében, mert ezek a technikák közvetlenül azonosíthatják a mintákban található kis mennyiségű vírus DNS-t vagy RNS-t. A kórokozó genetikai kódjának azonosításához nem szükséges, hogy a kórokozó éljen, ellentétben a baktériumkultúrával vagy a víruskultúrával. Nem igényli azt sem, hogy a fertőzés elég régen bekövetkezett ahhoz, hogy az embereknek kimutatható antitestreakció alakuljon ki (a fertőzések ELISA-módszerrel történő kimutatásának módja). Ez azt jelenti, hogy a PCR-technikák néha korábban képesek felismerni a betegségeket, mint más vizsgálatok. Még jobb, hogy az STD-k kimutathatók anélkül, hogy annyira kellene aggódnunk, hogy a mintákat életben tartsuk, vagy pontosan a megfelelő időben végezzük a vizsgálatokat.
A legjobb otthoni STD tesztek